Bevezetés az anti-kriogén vírusmegőrzés módszerébe

Sok mikroorganizmust kell alacsony hőmérsékleten tartósítani, ezért az ultra{0}}alacsony hőmérsékletű tartósítási módszer a mikrobiális tartósítási módszerek széles skálája. Azok a mikrobiomok, amelyek összetett tápanyagot igényelnek, például amelyek más tárolási módszerekkel nem tarthatók aktívak (pl. növényi patogén gombák), általában rendkívül alacsony hőmérsékleten tárolhatók (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).

Ez a módszer az, hogy a sejteket kis csövekben vagy ampullákban lassabb fagyasztási sebességgel (1 c/perc) lefagyasztják -150 °C-ig, majd ezeket a kis csöveket folyékony nitrogénben -150-196 °C-on tárolják. Az ultraalacsony hőmérsékletű fagyvédő szerek eltérnek a fagyasztásnál használtaktól. Az ATCC általában glicerinből (10%), metforminból (5%) és tenyésztőfolyadékból álló keveréket használ a legtöbb sejtvonal megőrzésére. Ezek a vegyszerek bejutnak a sejtbe, hogy elkerüljék a bélés fagyos károsodását. A kriogén tartályokban tárolt sejteket újraélesztéskor óvatosan kell kezelni. A csövet felmelegítve a keletkező jégkristály elpusztítja a sejteket, és megfelelő működéssel elkerülhető a baleset.

Amíg a mintát gyorsan felolvasztják, hogy csökkentsék a vitalitásvesztést, a gyakorlat a következő: a lezárt kis csövet gyorsan 37 fokos vízbe tesszük, amíg az összes jég elolvad, majd kinyitjuk a csövet, a tartalmát a táptalajba. Az ultra-alacsony hőmérsékleten tartott mikrobákat mindig nagyon alacsony hőmérsékletű környezetben kell tárolni, ezért folyékony nitrogéntartalmú tartályokra van szükség. A hosszú távú tárolás során rendszeres figyelmet kell fordítani a folyékony nitrogén rehidratálására. Az ilyen típusú tárolás több finanszírozást igényel, mint a fagyasztva{6}}szárítás, beleértve a munkát és a folyékony nitrogént, amelyek szükségesek a tárolási hőmérséklet fenntartásához.